Elabscience 持续十余年专注免疫检测试剂研发,搭建覆盖上千款 ELISA 试剂盒产品矩阵,覆盖人、小鼠、大鼠等多实验物种,每款试剂盒均执行原料、半成品、成品三重质检流程,优化试剂反应体系,降低实验数据波动。这款 IL-1β ELISA 试剂盒仅针对小鼠样本开发,适用样本包含小鼠血清、EDTA 抗凝血浆、细胞培养上清、组织灌洗液等生物体液,实验原理与同系列细胞因子试剂盒保持一致,采用双抗体夹心比色法,预包被酶标板固相载体结合抗小鼠 IL-1β 特异性捕获抗体,样本中 IL-1β 抗原与捕获抗体特异性结合,洗涤去除游离杂质后,依次添加生物素化检测抗体、HRP 标记亲和素,依靠生物素 - 亲和素特异性结合形成稳定免疫复合物,再次洗板后加入 TMB 显色底物,HRP 酶催化底物显色呈蓝色,滴加终止液后转为黄色,450nm 波长酶标仪读取吸光度数值,标准品梯度浓度与对应 OD 值拟合曲线,换算得到样本 IL-1β 浓度,整套实验全程耗时 3.5 小时。
小鼠样本前处理规范直接决定 IL-1β ELISA 试剂盒检测可靠性,不同样本类型处理方式存在区分。小鼠外周血采集后快速低温离心分离血清或 EDTA 血浆,全程规避溶血样本,红细胞破裂释放的胞内蛋白会提升非特异性显色背景;小鼠原代细胞培养上清收集后离心去除细胞沉淀,避免活细胞、细胞碎片干扰抗原抗体结合;小鼠组织匀浆样本需要冰浴研磨、离心取上清,去除组织碎屑;所有待测样本若 IL-1β 浓度超出试剂盒检测区间,使用配套样品稀释液做梯度稀释,完整记录稀释倍数用于后期浓度换算。样本短期检测可冷藏存放,长期保存建议分装冻存,减少反复冻融对 IL-1β 蛋白结构的破坏。
整套 IL-1β ELISA 试剂盒实验操作分为试剂平衡、加样孵育、洗板、显色读数四大阶段,每一步均有细节管控要点。试剂盒提前取出室温平衡,仅取用本次实验所需可拆卸酶标条,剩余板条密封避光保存;25 倍浓缩洗涤液用去离子水稀释为工作液,现配现用;冻干 IL-1β 标准品溶解后梯度倍比稀释,设置空白孔、梯度标准品孔、待测样本孔,每孔定量加入 100μL 液体,覆膜密封微孔 37℃恒温孵育;每轮孵育完成后多次洗板,充分去除微孔内游离试剂,减少背景干扰;TMB 底物溶液避光保存,加底物后遮光孵育,滴加终止液后半小时内完成酶标仪读数,延迟读数会出现显色衰减,导致浓度计算偏差。
IL-1β ELISA 试剂盒各组分具备差异化储存条件,未拆封完整试剂盒短期 2-8℃存放不超过一周,长期使用需要拆分各组分分类保存。可拆卸酶标板、冻干标准品、100× 浓缩生物素化检测抗体可置于 - 20℃避光环境,六个月内试剂性能稳定;100× 浓缩 HRP 酶结合物同样 - 20℃避光存放;样本稀释液、抗体稀释液、浓缩洗涤液、终止液统一 2-8℃冷藏;TMB 底物溶液 2-8℃单独避光存放。所有试剂使用后拧紧瓶盖,防止液体蒸发、微生物污染,吸取试剂时使用高精度移液枪定量操作,不直接倾倒瓶内液体。
该款 IL-1β ELISA 试剂盒出厂完成完整性能验证,特异性层面仅识别小鼠 IL-1β 蛋白,和其他小鼠同源细胞因子无明显交叉反应;板内、板间重复检测变异数值均维持在较低区间;针对小鼠血清、EDTA 血浆、细胞上清三类样本开展加标回收实验,回收率区间稳定。对于开展小鼠关节炎、肠炎、肺部炎症、代谢疾病模型的实验室,规范使用 IL-1β ELISA 试剂盒,统一孵育温度、洗板次数、读数时间,能够稳定实验数据重复性,精准评估动物模型体内炎症水平,支撑抗炎药物、免疫调控机制相关课题研究。
有关信息请见:http://www.elabflowab.com/Products-21513758.html
更多详情请见:https://www.chem17.com/st225730/product_21513758.html
IL-1β ELISA试剂盒|武汉伊莱瑞特生物科技


